您好!歡迎訪問上海根生生物科技有限公司網(wǎng)站!
全國(guó)服務(wù)咨詢熱線:

15216781845

當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 釀酒酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備、轉(zhuǎn)化

釀酒酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備、轉(zhuǎn)化

更新時(shí)間:2013-08-07      點(diǎn)擊次數(shù):7420

 釀酒酵母感受態(tài)細(xì)胞的制備

 
(1)從YPD平板上挑取一個(gè)新鮮的釀酒酵母EBY100單克隆至10 ml YPD液體培養(yǎng)基,30℃,250 rpm 培養(yǎng)過夜。
(2)測(cè)定過夜培養(yǎng)物的OD600值為3.0~5.0之間。
(3)將10 ml YPD過夜培養(yǎng)物稀釋至OD600值為0.2~0.4。
(4)在28~30℃搖床中繼續(xù)培養(yǎng)3~6 hr,使其OD600值達(dá)到0.6~1.0。
(5)于室溫1500 g 離心5 min 收集酵母細(xì)胞,棄上清。
(6)用10 ml 洗液洗酵母細(xì)胞,隨后于室溫1500 g 離心5 min離 心收集細(xì)胞,棄上清。
(7)用1 ml TE/LiAc重懸酵母細(xì)胞,以每管50 μl 分裝。
 
釀酒酵母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化
 
(1)取50 μl 感受態(tài)細(xì)胞,再加入待轉(zhuǎn)質(zhì)粒各2 μl,混勻。
(2)加入500 μl 轉(zhuǎn)化用溶液(PEG/LiAc,二甲亞砜),彈擊管壁混勻。
(3)30℃水浴1 h,隔15min彈擊管壁混勻。
(4)加入1毫升YPD培養(yǎng)液,30℃搖床培養(yǎng)1小時(shí)。
(5)3500 g 離心5 min ,留沉淀,棄上清。
(6)沉淀用150 μl TE重懸,涂相應(yīng)的SD平板;將平板倒置于30℃培養(yǎng)。
上海根生生物科技有限公司
地址:上海市奉賢區(qū)南橋鎮(zhèn)南橋路377號(hào)1幢
郵箱:genshengtech@163.com
傳真:86-021-64190979
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)
了解更多信息
主站蜘蛛池模板: 国内大量揄拍人妻精品視頻| 日韩xxxx厕所撒尿视频| 农村乱人伦一区二区| 香蕉视频911| 国产精品日本一区二区在线播放| www.一级毛片| 扒下胸罩揉她的乳尖调教| 久久精品无码中文字幕| 欧美性巨大欧美| 亚洲精品高清国产一久久| 精品久久久久久无码免费| 国产一区二区三区精品久久呦 | 日本一道高清一区二区三区| 亚洲a级成人片在线观看| 欧美色视频日本| 免费中文字幕一级毛片| 精精国产xxxx视频在线播放| 国产乱人激情H在线观看| 国产h在线播放| 国产精品亚洲专区一区| 97人人模人人爽人人少妇| 女人与公拘交酡过程高清视频 | 尹人久久久香蕉精品| 丰满多毛的陰户视频| 日韩AV无码久久精品免费| 亚洲av日韩综合一区久热| 欧美激情xxxx性bbbb| 亚洲线精品一区二区三区影音先锋| 男彩虹用的app小蓝| 午夜国产在线视频| 美女视频一区二区| 国产一区二区三区不卡在线观看| 高h视频在线播放| 国产无套粉嫩白浆在线观看| xxxxx做受大片视频| 国产精品欧美亚洲| 4ayy私人影院| 国产精品高清一区二区三区| 91精品国产人成网站| 国农村精品国产自线拍| 99久久免费国产精品|